产品货号:
SY0385
中文名称:
TEV蛋白酶
英文名称:
recombinant TEV Protease
产品规格:
1000U|10KU
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达到最佳活性,但在pH6.0~8.5和温度4~30℃的广泛范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。
表1.不同温度下rTEV酶切活性
反应时间(h) | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4℃ | 16℃ | 21℃ | 30℃ | |
1 | 34 | 58 | 56 | 70 |
2 | 58 | 80 | 78 | 90 |
3 | 71 | 99 | 99 | 99 |
3.5 | 84 | 99 | 99 | 99 |
在1×rTEV Buffer(50mM Tris,pH8.0,0.1mM EDTA,1mM DTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
来源 | 大肠杆菌 |
外观 | 无色透明液体 |
比活力 | 5U/μL |
纯化 | Ni柱亲和纯化 |
纯度 | ≥95%(by SDS-PAGE) |
组分 | 1000U | 10KU |
rTEV Protease(5U/μL) | 200μL | 10×200μL |
10×rTEV Buffer | 600μL | 10×600μL |
保存:-20℃,有效期6个月。
- 影响天然TEV酶活性的常见因素:
- PMSF和AEBSF(1mM),TLCK(1mM),Bestatin(1mg/mL),EDTA(1mM),Pestatin A(1mM)以及E-64(3mg/mL),而rTEV可兼容上述抑制剂;
- Zn离子浓度(>5mM),同样对rTEV活性有抑制;
- 与半胱氨酸反应的试剂,也是rTEV的潜在抑制剂。
- PMSF和AEBSF(1mM),TLCK(1mM),Bestatin(1mg/mL),EDTA(1mM),Pestatin A(1mM)以及E-64(3mg/mL),而rTEV可兼容上述抑制剂;
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本制品仅作科研用途!
- 在EP管中配制如下反应体系。
成分 用量 融合蛋白 40μg rTEV Protease(5U/μL) 4μL 10×rTEV buffer 10μL - 30℃孵育2h或4℃过夜。
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